ປະເທດ Catalase

ການສະ ໝັກ ແລະຫຼັກການ

ຂັ້ນຕອນນີ້ແມ່ນໃຊ້ເພື່ອ ກຳ ນົດກິດຈະ ກຳ catalase, ເຊິ່ງສະແດງອອກເປັນ Baker Units, ຂອງການກະກຽມທີ່ມາຈາກ Aspergillus niger var, ຕັບ bovine, ຫຼື Micrococcus lysodeikticus. ການຢັ້ງຢືນແມ່ນວິທີການ ໝົດ ແຮງໂດຍອີງໃສ່ການລະລາຍຂອງ hydrogen peroxide ໂດຍ catalase ແລະການລະບາຍຂອງ catalase ພ້ອມກັນໂດຍ peroxide ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂທີ່ຄວບຄຸມ.

Reagents ແລະ Solutions
ການແກ້ໄຂ Ammonium Molybdate (1%) ລະລາຍ 1,0 g ຂອງ ammonium molybdate [(NH4) 6MoO24 · 4H2O] (Merck, Catalog No. 1182) ໃນນ້ ຳ, ແລະເຈືອຈາງລົງ 100 mL.
0.250 N Sodium Thiosulfate ລະລາຍ 62,5 g ຂອງ sodium thiosulfate (Na2S2O3 · 5H2O) ໃນ 750 ມລຂອງນ້ ຳ ທີ່ຕົ້ມແລະເຢັນໃນປະຈຸບັນ, ເພີ່ມ 3.0 ມລຂອງ 0,2 N sodium hydroxide ເປັນເຄື່ອງດຸ່ນດ່ຽງ, ເຈືອຈາງລົງເຖິງ 1000 ມລກັບນ້ ຳ, ແລະປະສົມ. ມາດຕະຖານຕາມທີ່ໄດ້ ກຳ ນົດໄວ້ ສຳ ລັບ 0.1 N Sodium Thiosulfate (ເບິ່ງໂຊລູຊັ່ນແລະຕົວຊີ້ວັດ), ແລະຖ້າ ຈຳ ເປັນກໍ່ຕ້ອງປັບຕົວໃຫ້ສູງຂື້ນກັບ 0.250 N.

ໂຊລູຊຽມ Substrate Solution ລະລາຍ 25.0 g ຂອງສານຟອກໂຊຊຽມ sodiumas (phonhate) anhydrous ຂາດແຄນ (Na2HPO4), ຫຼື 70,8 g ຂອງ Na2HPO4 · 12H2O, ໃນນ້ ຳ ປະມານ 1500 ມລ, ແລະປັບເປັນ pH 7.0 ± 0.1 ດ້ວຍກົດ phosphoric 85%. ລະມັດລະວັງຕື່ມ 100 ມລຂອງ 30% hydrogen peroxide, ເຈືອຈາງຫາ 2000 ມລໃນໄລຍະຈົບການສຶກສາ, ແລະປະສົມ. ເກັບຮັກສາໄວ້ໃນຂວດອໍາພັນທີ່ສະອາດ, ຢຸດຊະງັກ. ການແກ້ໄຂແມ່ນ ໝັ້ນ ຄົງເປັນເວລາຫຼາຍກວ່າ 1 ອາທິດຖ້າຮັກສາໄວ້ 5 ອົງສາໄວ້ໃນຖັງເຕັມ. (ດ້ວຍຊັ້ນຍ່ອຍທີ່ກຽມໄວ້ ໃໝ່ໆ, ກະເປົ່າຈະຕ້ອງໃຊ້ປະມານ 16 ມລຂອງ 0,250 N ໂຊດຽມ Thiosulfate ຖ້າວ່າຝາເປົ່າຕ້ອງໃຊ້ບໍ່ເກີນ 14 ມລ, ການແກ້ໄຂບັນຈຸບໍ່ຍ່ອຍແມ່ນບໍ່ ເໝາະ ສົມແລະຄວນກຽມຕົວ ໃໝ່ ອີກເທື່ອ ໜຶ່ງ. % ຂອງສິ່ງທີ່ຕ້ອງການ ສຳ ລັບເຄື່ອງເປົ່າ.)

ຂັ້ນຕອນ
ທໍ່ທີ່ມີຂະ ໜາດ ບໍ່ເກີນ 1.0 ມລຂອງຕົວຢ່າງ, ກ່ອນ ໜ້າ ນີ້ເຈືອຈາງເພື່ອບັນຈຸ catalase ປະມານ 3.5 Bits, ເຂົ້າໃນຖັງຂະ ໜາດ 200 ມມ ເພີ່ມຢ່າງໄວວາ 100 ມລຂອງໂຊລູຊຽມ Substrate Solution, ກ່ອນ ໜ້າ ນີ້ປັບເປັນ 25, ແລະກະຕຸ້ນທັນທີ 5 ຫາ 10 s. ກວມເອົາ beaker ໄດ້, ແລະບ່ອນທີ່ 25 ± 1 ຈົນກ່ວາຕິກິຣິຍາໄດ້ຖືກສໍາເລັດ. stir ຢ່າງແຂງແຮງສໍາລັບ 5 s, ແລະຈາກນັ້ນທໍ່ 4,0 mL ຈາກ beaker ເຂົ້າໄປໃນແກ້ວຂະຫນາດນ້ອຍ 50 mL Erlenmeyer. ຕື່ມ 5 ມລກຂອງອາຊິດຊູນຟູຣິກ 5 N ໃສ່ແປ້ງ, ປະສົມ, ຫຼັງຈາກນັ້ນຕື່ມ 5,0 ມລຂອງລິດໂພແທດຊຽມໄອໂອດີນ 40%, ກຽມພ້ອມ ໃໝ່, ແລະ 1 ຢອດຂອງ Ammonium Molybdate Solution (1%), ແລະປະສົມ. ໃນຂະນະທີ່ສືບຕໍ່ຜະສົມຜະສານ, ໃຫ້ຫຼຸດລົງຢ່າງໄວວາເຖິງຈຸດສິ້ນສຸດທີ່ບໍ່ມີສີພ້ອມດ້ວຍ 0.250 N Sodium Thiosulfate, ບັນທຶກປະລິມານ, ໃນມິນລິລິດ, ຈຳ ເປັນເຊັ່ນດຽວກັນກັບ S. ປະຕິບັດການຕັດສິນໃຈເປົ່າກັບ 4.0 mL ຂອງ Peroxide Substrate Solution, ແລະບັນທຶກປະລິມານທີ່ຕ້ອງການ, ໃນມິນລິລິດ ຂ.

[ໝາຍ ເຫດ: ເມື່ອການກຽມຕົວທີ່ໄດ້ມາຈາກຕັບຊີ້ນງົວແມ່ນໄດ້ຮັບການທົດສອບ, ປະຕິກິລິຍາແມ່ນ ສຳ ເລັດພາຍໃນ 30 ນາທີ. ການກະກຽມທີ່ມາຈາກ Aspergillus ແລະແຫຼ່ງອື່ນໆອາດຈະຕ້ອງໃຊ້ເວລາເຖິງ 1 ຊມ. ໃນການຍຶດເອົາ enzyme ຂອງຕົ້ນກໍາເນີດທີ່ບໍ່ຮູ້ຈັກ, ດໍາເນີນການເປີເຊັນຫຼັງຈາກ 30 ນາທີແລະຫຼັງຈາກນັ້ນໃນໄລຍະ 10 ນາທີຕໍ່ມາ. ປະຕິກິລິຍາແມ່ນສົມບູນເມື່ອສອງສ່ວນສິບຕິດຕໍ່ກັນຄືກັນ.]

ການຄິດໄລ່
ຫນ່ວຍບໍລິການ Baker ໜຶ່ງ ແມ່ນຖືກ ກຳ ນົດວ່າເປັນ ຈຳ ນວນ catalase ເຊິ່ງຈະເຮັດໃຫ້ທາດ hydrogen peroxide 264 ມລກພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂຂອງການຍື່ນຍັນ.
ຄິດໄລ່ກິດຈະ ກຳ ຂອງຕົວຢ່າງໂດຍສົມຜົນ
ໜ່ວຍ ງານ Baker / g ຫຼື mL = 0.4 (B S) × (1 / C)

ໃນນັ້ນ C ແມ່ນທາດມິນລິລິດລິດຂອງການກະກຽມເອນໄຊດ໌ຕົ້ນສະບັບທີ່ເພີ່ມເຂົ້າໃນແຕ່ລະ 100 ມລຂອງ Peroxide Substrate Solution, ຫຼືເມື່ອ 1 ມລຂອງທາດແຫຼວທີ່ລະລາຍຖືກ ນຳ ໃຊ້, C ແມ່ນປັດໄຈການລະລາຍ; B ແມ່ນປະລິມານ, ເປັນມິນລິລິດ, ດັ່ງທີ່ໄດ້ ກຳ ນົດໄວ້ຂ້າງເທິງ; ແລະ S ແມ່ນມິນລີກຣາມຂອງ 0.250 N Sodium Thiosulfate, ດັ່ງທີ່ໄດ້ ກຳ ນົດໄວ້ຂ້າງເທິງ.

ການຄົ້ນຄ້ວາພິສູດ

ການຫຸ້ມຫໍ່ແລະການເກັບຮັກສາ

ຖົງຫຸ້ມຫໍ່ອາຫານແຂງ, 25 ກິໂລ / ຖັງ.

Catalase ຄວນເກັບມ້ຽນໄວ້ໃນບ່ອນແຫ້ງ, ເຢັນແລະມີອາກາດຖ່າຍເທດີຫ່າງຈາກແສງແດດ, ຄວາມຮ້ອນ.

ການຈ່າຍເງິນ:T / T, Paypal, Western Union, ການຮັບປະກັນດ້ານການຄ້າຂອງ Alibaba, VISA, MasterCard, ການກວດສອບອີເລັກໂທຣນິກ, ການຈ່າຍເງິນຕໍ່ມາ, LC ແລະອື່ນໆ.