Beta glucan

ການສະ ໝັກ ແລະຫຼັກການ

ການສະ ໝັກ ແລະຫຼັກການ This procedure is used to determine Beta glucan activity of enzyme preparations derived from Aspergillus niger var. and Bacillus subtilis var. The assay is based on a 15-min hydrolysis of lichenin substrate at 40°and at pH 6.5. The increase in reducing power due to liberated reducing groups is measured by the neocuproine method.

Reagents ແລະ Solutions
Phosphate Buffer ລະລາຍ 13,6 g ຂອງຟອສເຟດໂພແທດຊຽມ monobasic ໃນນ້ ຳ ປະມານ 1900 ມລ, ຕື່ມໂຊລູຊຽມ hydroxide 70% ຈົນກ່ວາ pH ແມ່ນ 6,5 ± 0.05, ຫຼັງຈາກນັ້ນໂອນວິທີແກ້ໄຂເຂົ້າໄປໃນລະດັບໄຟຟ້າປະລິມານ 2000 ມລ, ເຮັດໃຫ້ລະລາຍປະລິມານກັບນ້ ຳ, ແລະປະສົມ .
Neocuproine Solution ສານລະລາຍ 40.0 g ຂອງຄາບອນ sodium anhydrous, glycine 16.0 g, ແລະ pentahydrate sulfate ຖ້ວຍ 450 ມລກໃນນ້ ຳ ປະມານ 600 ມລ. ໂອນວິທີແກ້ໄຂອອກເປັນທ່ອນປະລິມານທີ່ມີຄວາມຈຸ 1000 ມລ, ເຈືອຈາງລົງໃນປະລິມານດ້ວຍນ້ ຳ, ແລະປະສົມ.
Neocuproine Solution B ລະລາຍນ້ ຳ neocuproine hydrochloride 600 ມລກໃນປະລິມານນ້ ຳ ປະມານ 400 ມລ, ໂອນວິທີແກ້ໄຂອອກເປັນໄຟລະດັບ 500 ມລ, ປະສົມປະລິມານໃຫ້ກັບນ້ ຳ, ແລະປະສົມ. ຍົກເລີກໃນເວລາທີ່ສີເຫຼືອງພັດທະນາ.
Lichenin Substrate Grind 150 mg of lichenin (Sigma Chemical Co. , Catalog No L-6133, ຫຼືທຽບເທົ່າ) ກັບຝຸ່ນລະອຽດໃນປູນ, ແລະລະລາຍໃນນ້ ຳ ປະມານ 50 ມລປະມານ 85 °. ຫຼັງຈາກການແກ້ໄຂ ສຳ ເລັດແລ້ວ (20 ຫາ 30 ນາທີ), ຕື່ມ sodium borohydride 90 ມລກແລະສືບຕໍ່ໃຫ້ຄວາມຮ້ອນຕໍ່າກວ່າຈຸດທີ່ຕົ້ມສຸກແລ້ວ 1 ຊົ່ວໂມງ. ຕື່ມ 15 g ຂອງ Amberlite MB-3, ຫຼືນ້ ຳ ຢາງແລກປ່ຽນທາດ ion ທຽບເທົ່າ, ແລະກະຕຸ້ນຕໍ່ເນື່ອງເປັນເວລາ 30 ນາທີ. ກັ່ນຕອງດ້ວຍຄວາມຊ່ວຍເຫຼືອຂອງສູນຍາກາດຜ່ານເຈ້ຍກັ່ນຕອງ Whatman ເລກ 1, ຫຼືທຽບເທົ່າ, ໃນທໍ່ລະບາຍBüchner, ແລະລ້າງເຈ້ຍດ້ວຍນ້ ຳ ປະມານ 20 ມລ. ຕື່ມຟອສເຟດໂພແທດຊຽມ monobasic 680 ມລກເຂົ້າໃສ່ເຄື່ອງກອງນ້ ຳ, ແລະກັ່ນຕອງຜ່ານແຜ່ນກັ່ນຕອງ 0,2-2m Millipore, ຫຼືເທົ່າກັບ. ລ້າງແຜ່ນຮອງດ້ວຍນ້ ຳ 10 ມລ, ແລະປັບລະດັບ pH ຂອງນ້ ຳ ໃຫ້ຢູ່ທີ່ 6,5 ± 0.05 ດ້ວຍນ້ ຳ ໂຊດຽມ sodium 1 N ຫຼືກົດອາຊິດ hydrochloric 1 N. ໂອນນ້ ຳ ອັດລົມເຂົ້າໄປໃນເຕົາປະລິມານ 100 ມມ, ເຈືອຈາງລົງໃສ່ປະລິມານທີ່ມີນ້ ຳ, ແລະປະສົມເຂົ້າກັນ. ເກັບຮັກສາໄວ້ໃນອຸນຫະພູມ 2 ອົງສາເຖິງ 4 ອົງສາບໍ່ເກີນ 3 ວັນ.
ລະດັບການແກ້ໄຂບັນຫາ Glucose ມາດຕະຖານ 36.0 ມລກຂອງທາດລະລາຍທີ່ບໍ່ມີທາດໃນ Phosphate Buffer ໃນລະດັບໄຟຂະ ໜາດ 1000 ມລ, ປະສົມປະລິມານກັບນ້ ຳ, ແລະປະສົມ.
ການກະກຽມການທົດສອບກຽມວິທີແກ້ໄຂຈາກຕົວຢ່າງການກະກຽມ enzyme ເພື່ອໃຫ້ 1 ml ຂອງການລະລາຍສຸດທ້າຍຈະມີລະຫວ່າງ 0.01 ແລະ 0.02 ຫົວ ໜ່ວຍ glucan glucan. ຊັ່ງນໍ້າ ໜັກ ຂອງຕົວຢ່າງ, ໂອນມັນເຂົ້າໄປໃນແປນທີ່ມີຂະ ໜາດ ທີ່ ເໝາະ ສົມ, ເຈືອຈາງປະລິມານກັບ Phosphate Buffer, ແລະປະສົມ.

ຂັ້ນຕອນ
ທໍ່ຂະ ໜາດ 2 ມລຂອງ Lichenin Substrate ເຂົ້າໄປໃນທໍ່ທົດລອງ 4 ແຍກຕ່າງຫາກທີ່ຮຽນຈົບ 25 mL, ແລະເຮັດຄວາມຮ້ອນຂອງທໍ່ນ້ ຳ ໃນບ່ອນອາບນ້ ຳ ທີ່ 40 °ປະມານ 10 ຫາ 15 ນາທີເພື່ອໃຫ້ສົມດຸນ.
ຫຼັງຈາກທີ່ມີຄວາມສົມດຸນ, ເພີ່ມ 1 ມິລີລິດຂອງ Phosphate Buffer ໃສ່ທໍ່ 1 (ຊັ້ນໃຕ້ດິນເປົ່າຫວ່າງ), 1 ml ຂອງ Glucose Standard Solution ເຂົ້າທໍ່ 2 (ມາດຕະຖານ glucose), 4 mL ຂອງ Neocuproine Solution A ແລະ 1 ml ຂອງການທົດສອບການກຽມຕົວເຂົ້າທໍ່ 3 (enzyme blank) ), ແລະ 1 ມລຂອງການກະກຽມທົດສອບເພື່ອທໍ່ 4 (ຕົວຢ່າງ). ກະກຽມທໍ່ທີຫ້າ ສຳ ລັບຊ່ອງຫວ່າງຂອງຊ່ອງຫວ່າງ, ແລະຕື່ມຟອສເຟດ 3 ມລ.
ເອົາທໍ່ 5 ຫຼອດທີ່ 40 ອົງສາປະມານ 15 ນາທີ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນຕື່ມ Neocuproine Solution A 4 ມລໃສ່ທໍ່ 1, 2, 4, ແລະ 5. ຕື່ມ 4 ມລຂອງນ້ ຳ ມັນ Neocuproine Solution B ທັງ ໝົດ 5 ຫຼອດ, ແລະໃສ່ແຕ່ລະຫົວຢ່າງ ເໝາະ ສົມ marble ຂະຫນາດແກ້ວ.
[ຂໍ້ຄວນລະວັງ: ຫ້າມໃຊ້ຢາງຢຸດ. ]
ເຮັດຄວາມຮ້ອນຂອງທໍ່ນ້ ຳ ໃສ່ອາບນ້ ຳ ທີ່ຕົ້ມຢ່າງແຂງແຮງປະມານ 12 ນາທີເພື່ອພັດທະນາສີ, ຈາກນັ້ນເຮັດໃຫ້ເຢັນໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງໃນນ້ ຳ ເຢັນ, ແລະປັບປະລິມານຂອງແຕ່ລະ ໜ່ວຍ ໃຫ້ 25 ມລກດ້ວຍນ້ ຳ. ໃສ່ທໍ່ທີ່ມີ Parafilm, ຫຼືການປິດອື່ນໆທີ່ ເໝາະ ສົມ, ແລະປະສົມເຂົ້າກັນໂດຍກັນຫຼາຍຄັ້ງ.
ກຳ ນົດຄວາມດູດຊືມຂອງແຕ່ລະວິທີແກ້ໄຂທີ່ 450 nm ໃນຈຸລັງ 1 ຊມ, ມີກ້ອງສ່ອງທາງໄກທີ່ ເໝາະ ສົມ, ຕ້ານກັບ buffer ເປົ່າໃນທໍ່ 5.

ການຄິດໄລ່
ໜ່ວຍ ໜຶ່ງ ທີ່ເອີ້ນວ່າ Beta glucan (BGU) ຖືກ ກຳ ນົດເປັນ ຈຳ ນວນຂອງເອນໄຊທີ່ຈະຊ່ວຍຫຼຸດຜ່ອນການຫຼຸດ ນຳ ້ຕານ (ເທົ່າກັບລະດັບນ້ ຳ ຕານໃນອັດຕາເທົ່າກັບ glucose) ໃນອັດຕາ 1 µmol / min ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂຂອງການຍື່ນຍັນ.
ຄິດໄລ່ກິດຈະ ກຳ ຂອງການກະກຽມເອນໄຊທີ່ ນຳ ມາວິເຄາະດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:
BGU = [(A4 A3) × 36 × 106] / [(A2 A1) × 180 × 15 × sampleg ຕົວຢ່າງ]

ໃນນັ້ນ A4 ແມ່ນການດູດຊຶມຂອງຕົວຢ່າງ (ທໍ່ 4), A3 ແມ່ນການດູດຊຶມຂອງທາດ enzyme ເປົ່າ (ທໍ່ 3), A2 ແມ່ນການດູດຊຶມຂອງມາດຕະຖານ glucose (tube 2), A1 ແມ່ນການດູດຊຶມຂອງທາດຍ່ອຍທີ່ຫວ່າງໄວ້ (ຫຼອດທໍ່) 1), 36 ແມ່ນໄມໂຄຣໂມຊູນໃນວິຕາມິນໂຊລູຊັ່ນແກ້ໄຂບັນຫາ, 106 ແມ່ນປັດໄຈທີ່ປ່ຽນໄມໂຄຼໂມໂກກຼາມໃຫ້ເປັນກຼາມ, 180 ແມ່ນນ້ ຳ ໜັກ 1 µmol ຂອງນ້ ຳ ຕານ, ແລະ 15 ແມ່ນເວລາປະຕິກິລິຍາ, ໃນນາທີ.

ການຄົ້ນຄ້ວາພິສູດ

* ຂໍ້ມູນຂ້າງເທິງແມ່ນການແປຂໍ້ມູນໂດຍກົງໃຫ້ແກ່ Newgen Biotech ຈາກຜູ້ຜະລິດຜະລິດຕະພັນນີ້. ໃບຢັ້ງຢືນການວິເຄາະນີ້ຄວນຖືກ ນຳ ໃຊ້ເພື່ອຈຸດປະສົງຂໍ້ມູນຂ່າວສານແລະບໍ່ມີຈຸດປະສົງເພື່ອທົດແທນການວິເຄາະຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຢ່າງເຂັ້ມງວດໂດຍຜູ້ຊື້ຜະລິດຕະພັນນີ້.

ການຫຸ້ມຫໍ່ແລະການເກັບຮັກສາ

ຖົງຫຸ້ມຫໍ່ອາຫານແຂງ, 25 ກິໂລ / ຖັງ.

ເກັບຮັກສາໃນບ່ອນແຫ້ງ, ເຢັນແລະມີອາກາດຖ່າຍເທດີຫ່າງຈາກແສງແດດ, ຄວາມຮ້ອນ.

ການຈ່າຍເງິນ:T / T, Paypal, Western Union, ການຮັບປະກັນດ້ານການຄ້າຂອງ Alibaba, VISA, MasterCard, ການກວດສອບອີເລັກໂທຣນິກ, ການຈ່າຍເງິນຕໍ່ມາ, LC ແລະອື່ນໆ.